Technologie de liaison enzymatique
La ligature enzymatique permet de construire un ARN complet à partir de fragments courts et de haute pureté assemblés par une enzyme. Nous utilisons cette approche de deux manières : la synthèse enzymatique d'ARNsi pour une production évolutive et flexible, et GenClip™ pour la production d'ARN longs de 100 à 500 mères.
Deux applications de la ligature enzymatique
Ces deux approches partent de fragments plus courts et de haute pureté qui sont assemblés par voie enzymatique, ce qui permet la synthèse d'ARNsi à l'échelle industrielle et la synthèse d'ARN longs de 100 à 500 mères.
Synthèse enzymatique d'ARNsi
Idéal pour : la synthèse d'ARNsi à grande échelle et complexe/multivalente
Méthode : siRNA assemblé à partir de courts fragments sens et antisens par ligature enzymatique
Assemblage de fragments : les fragments sens et antisens complémentaires s'hybrident directement, ce qui évite d'avoir recours à un brin guide distinct.
Avantage clé : réduction des impuretés de type N±1, diminution du nombre d'étapes de purification et flexibilité de fabrication grâce à une approche basée sur les fragments
Synthèse d'ARN longs GenClip™
Idéal pour : les ARN longs , notamment les ARN guides (sgRNA), les pré-miARN et les ARNm
Approche : synthèse d'ARN longs de 100 à 500 mères
Assemblage de fragments : de courtes chaînes d'ADN alignent les fragments d'ARN en vue d'une ligature enzymatique
Avantage clé : associe la synthèse en phase solide et la ligature enzymatique afin d'optimiser le rendement et la qualité pour les séquences d'ARN plus longues
Synthèse enzymatique d'ARNsi
Notre technologie de siRNA enzymatique repose sur la ligature, médiée par une enzyme, de quatre fragments d'ARN ou plus afin de produire des composés siRNA ciblés grâce à une approche évolutive basée sur des fragments. Les fragments d’ARN peuvent être synthétisés à l’aide d’AJIPHASE™ ou de SPOS, puis assemblés à l’aide de notre enzyme de ligature exclusive, conçue pour prendre en charge un large éventail d’acides nucléiques modifiés. Une stratégie de contrôle axée sur la qualité intègre la production de fragments bruts de haute pureté, le développement du processus de ligature et une purification en aval simplifiée, ce qui réduit la nécessité d’une purification individuelle des fragments sens et antisens et garantit une qualité constante du produit.
Numéro de demande de brevet : WO2020171092 — Procédé de production d'un oligonucléotide modifié comprenant une séquence complémentaire
Synthèse d'ARN longs GenClip™
GenClip™ permet la synthèse d'ARN longs (100 à 500 mères) avec un rendement élevé et une grande qualité. Il peut également être utilisé pour la synthèse d'ARN guide (sgRNA), de pré-miARN et d'ARNm. Grâce à leur grande qualité, les ARN longs produits avec GenClip™ peuvent également servir d'étalons analytiques.
La combinaison de la synthèse en phase solide et de la ligature enzymatique permet d'obtenir un rendement supérieur à celui des méthodes conventionnelles, et GenClip™ peut être utilisé pour diverses modifications chimiques telles que le 2′-F, le 2′-MOE et le LNA. GenClip™ est actuellement disponible à des fins de recherche (non-GMP) ; sa fabrication selon les normes GMP est en cours de développement.
Numéro de demande de brevet : WO2024048684 — Procédé de production d'une molécule d'acide nucléique
Discutons des techniques de ligature enzymatique
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siRNA à grande échelle. ARN longs de haute qualité.