酶促连接技术
酶促连接技术通过酶将短的高纯度片段连接起来，从而构建出全长RNA。我们以两种方式应用该方法：酶促siRNA合成，用于可扩展且灵活的生产；以及GenClip™技术，用于合成长度为100至500核苷酸的长RNA。
酶介导连接的两种应用
这两种方法都以较短、高纯度的片段为起点，通过酶促连接进行组装，从而支持工业规模的siRNA合成以及长度为100至500核苷酸的长RNA合成。
酶促siRNA合成
最适合：大规模及复杂/多价siRNA的合成
方法：通过酶促连接，将短的正向和反向片段组装成siRNA
片段连接：同向和反向片段可直接退火，无需单独的引导链
主要优势：通过基于片段的方法，减少了N±1杂质，简化了纯化步骤，并提高了生产灵活性
GenClip™ 长RNA合成
最适合：长 链RNA，包括sgRNA、前体miRNA和mRNA
方法：从100至500核苷酸长度的RNA合成
片段连接：短DNA片段将RNA片段对齐，以便进行酶促连接
主要优势：结合了 固相合成和酶促连接技术，可提高较长RNA序列的收率和质量
酶促siRNA合成
我们的酶促siRNA技术利用酶介导的连接反应，将四个或更多RNA片段连接起来，通过一种可扩展的、基于片段的方法制备靶向siRNA化合物。 这些RNA片段可使用AJIPHASE™或SPOS进行合成，并通过我们专有的连接酶进行连接，该酶专为适应各种修饰的核酸而设计。以质量为核心的控制策略整合了高纯度粗片段制备、连接工艺开发以及简化的下游纯化步骤，从而减少了对正向和反向片段分别纯化的需求，并确保了产品品质的一致性。
专利申请号：WO2020171092— 一种制备包含互补序列的修饰寡核苷酸的方法
GenClip™ 长RNA合成
GenClip™ 能够以高产率和高纯度合成长链 RNA（100–500 核苷酸）。它还可用于合成 sgRNA、前体 miRNA 和 mRNA；此外，由于其高品质，使用 GenClip™ 合成的长链 RNA 也可用作分析标准品。
固相合成与酶联接技术的结合，使其产率高于传统方法，且GenClip™适用于多种化学修饰，例如2′-F、2′-MOE和LNA。GenClip™目前可用于研究用途（非GMP）；GMP生产正在开发中。
专利申请号：WO2024048684— 核酸分子制备方法
让我们来探讨一下酶联连接技术
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大规模siRNA。高质量的长RNA。