Enzymatische Ligationstechnologie
Bei der enzymatischen Ligation wird eine RNA in voller Länge aus kurzen, hochreinen Fragmenten gebildet, die durch ein Enzym miteinander verbunden werden. Wir wenden diesen Ansatz auf zwei Arten an: zur enzymatischen siRNA-Synthese für eine skalierbare und flexible Herstellung sowie mit GenClip™ zur Herstellung langer RNA-Moleküle mit einer Länge von 100 bis 500 Mer.
Zwei Anwendungsbereiche der enzymatischen Ligation
Beide Ansätze basieren auf kürzeren, hochreinen Fragmenten, die enzymatisch miteinander verbunden werden, was die siRNA-Synthese im industriellen Maßstab sowie die Synthese langer RNA-Moleküle mit einer Länge von 100 bis 500 Mer ermöglicht.
Enzymatische siRNA-Synthese
Am besten geeignet für: Groß angelegte und komplexe/multivalente siRNA-Synthese
Vorgehensweise: Aus kurzen Sense- und Antisense-Fragmenten durch enzymatische Ligation zusammengesetzte siRNA
Fragmentverbindung: Komplementäre Sense- und Antisense-Fragmente verbinden sich direkt miteinander, sodass kein separater Leitstrang erforderlich ist.
Wesentlicher Vorteil: Reduzierte N±1-Verunreinigungen, weniger Reinigungsschritte und Flexibilität bei der Herstellung durch einen fragmentbasierten Ansatz
GenClip™-Synthese langer RNA-Moleküle
Am besten geeignet für: Lange RNA, einschließlich sgRNA, Prä-miRNA und mRNA
Vorgehensweise: Synthese langer RNA-Moleküle mit einer Länge von 100 bis 500 Mer
Fragmentverbindung: Kurze DNA-Stücke richten RNA-Fragmente für die enzymatische Ligation aus
Wesentlicher Vorteil: Kombiniert Festphasensynthese und enzymatische Ligation, um Ausbeute und Qualität bei längeren RNA-Sequenzen zu optimieren
Enzymatische siRNA-Synthese
Unsere enzymatische siRNA-Technologie nutzt die enzymvermittelte Ligation von vier oder mehr RNA-Fragmenten, um Ziel-siRNA-Verbindungen mittels eines skalierbaren, fragmentbasierten Ansatzes herzustellen. Die RNA-Fragmente können mit AJIPHASE™ oder SPOS synthetisiert werden und werden mithilfe unseres firmeneigenen Ligationsenzyms verbunden, das für eine breite Palette modifizierter Nukleinsäuren ausgelegt ist. Eine qualitätsorientierte Kontrollstrategie vereint die Herstellung hochreiner Rohfragmente, die Entwicklung des Ligationsprozesses und eine vereinfachte nachgelagerte Reinigung. Dadurch entfällt die Notwendigkeit einer individuellen Reinigung von Sense- und Antisense-Fragmenten, was eine gleichbleibende Produktqualität gewährleistet.
Patentanmeldungsnummer: WO2020171092 – Verfahren zur Herstellung eines modifizierten Oligonukleotids mit komplementärer Sequenz
GenClip™-Synthese langer RNA-Moleküle
GenClip™ ermöglicht die Synthese langer RNA-Moleküle (100–500 Mer) mit hoher Ausbeute und hoher Qualität. Es eignet sich zudem für die Synthese von sgRNA, Prä-miRNA und mRNA, und aufgrund ihrer hohen Qualität können die mit GenClip™ hergestellten langen RNA-Moleküle auch als analytische Standards verwendet werden.
Die Kombination aus Festphasensynthese und enzymatischer Ligation ermöglicht höhere Ausbeuten als herkömmliche Verfahren, und GenClip™ eignet sich für verschiedene chemische Modifikationen wie 2′-F, 2′-MOE und LNA. GenClip™ ist derzeit für Forschungszwecke (Non-GMP) erhältlich; die GMP-konforme Herstellung befindet sich in der Entwicklung.
Patentanmeldungsnummer: WO2024048684 – Verfahren zur Herstellung von Nukleinsäuremolekülen
Lassen Sie uns über die enzymatische Ligation
für Ihr Programm sprechen
siRNA in großem Maßstab. Lange RNA von hoher Qualität.